ホウレンソウ(Spinacea oleracea L.)における細胞分裂促進のためのプロトプラスト単離および培養条件
ホウレンソウ葉肉組織から効果的にプロトプラストを単離し，培養する方法を検討した．無菌的に育成したホウレンソウ‘次郎丸’の根部を取り除き，葉肉組織を細断した後，酵素液(0.1%ペクトリアーゼY23，0.3%セルラーゼオノズカRSを含むCPW9M)で処理を行うと，損傷を受けて壊れるプロトプラストが多かった．しかし，細断せずに酵素処理を行い，CPW21Sでプロトプラストを精製すると，健全で活性の高いプロトプラストが多数得られた．次に，プロトプラストの培養条件について実験を行った．プロトプラストの分裂率は培地のpHによって差がみられ，分裂が最も旺盛だったのはpHを5.8に調整した培地であった．プロトプラスト収量は供試材料の成育日数が増すと増加したが，分裂率は播種後10-15日で最も高かった．収量と分裂率の結果から，最もプロトプラストの培養に適しているのは播種後10-15日の材料であった．プロトプラストの培養密度が1.0×105protoplasts/mlで最も分裂率が高く，密度が低下すると分裂率が顕著に減少する傾向があった．
キーワード：バイオテクノロジー,プロトプラスト,単離,細胞分裂,Spinacea oleracea L..
東洋食品工業短期大学・東洋食品研究所研究報告書，23，1-7，(2000)
